ELISA試劑盒是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。在實(shí)際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
ELISA試劑盒組成
1. 微孔板 (固相抗體) 96 well
2. 標(biāo)記抗體 (30倍濃縮,HRP標(biāo)記抗體) 0.4 ml
3. 標(biāo)準(zhǔn)品 0.5 ml × 2
4. EIA緩沖液 (1% BSA, 0.05% Tween-20 含有PBS) 30 ml
5. 標(biāo)記抗體稀釋液 (1% BSA, 0.05% Tween-20 含有PBS) 12 ml
6. 顯色液 (TMB底物液) 15 ml
7. 終止液 (1N硫酸) 12 ml
8. 洗滌緩沖濃縮液 (40倍濃縮,0.05% Tween-20的磷酸緩沖液) 50 ml
ELISA試劑盒檢測(cè)范圍和保存條件及有效期
1. 試劑盒保存:2-8℃;
2.有效期:6個(gè)月。
ELISA試劑盒注意
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
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