在ELISA試劑盒檢查實(shí)驗(yàn)中,包被原的性質(zhì)很主要,蛋白濃度,是不是降解,這到你做出的抗體可不可以被其識(shí)別,所以保留抗原很主要,做重組蛋白時(shí),要在冰浴下緩慢消融即是這個(gè)道理。即是讓很多不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑,然后排擠ELISA試劑盒后的過程中攪擾物質(zhì)的再吸附。但有時(shí)因?yàn)閷?shí)驗(yàn)的需求,包被原的特殊性也也許選用中性的緩沖溶液來(lái)包。
操作竅門:
1.加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
2.合理安排檢查量,避免反響板過多造成洗板等候時(shí)刻長(zhǎng)。
3.汲取液體時(shí),要用量程和需求量挨近的槍去吸,削減差錯(cuò)。
4.ELISA試劑盒要盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這么才既能確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度。
5.樣品稀釋液運(yùn)用加液器加注,并常常校正其準(zhǔn)確性。
6.為避免樣品蒸騰,實(shí)驗(yàn)時(shí)將反響板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
7.未運(yùn)用完的酶標(biāo)板或許試劑,請(qǐng)于2-8℃保存。辣根過氧化物酶符號(hào)抗人IgG工作液請(qǐng)根據(jù)所需的量裝備運(yùn)用。請(qǐng)勿重復(fù)運(yùn)用已稀釋過的辣根過氧化物酶符號(hào)抗人IgG工作液。
8.ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,加樣后及時(shí)放人孵箱,標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。避免孵育時(shí)刻人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性緊附于反響孔周圍,難以清洗*。
9.剩下樣品及拋棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后拋棄。
10.ELISA試劑盒洗刷時(shí)各孔均需加滿液體,避免孔口有游離酶不能洗凈。
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