ELISA試劑盒抗原的免疫原性,首先決定于其自身的化學特性,但同一種抗原,對不同種動物或同種動物不同個體間其免疫原性強弱,可表現(xiàn)很大差異,因此一種抗原的免疫原性是由其化學性質(zhì)和宿主因素決定的。具有免疫原性的物質(zhì)稱為免疫原(immunogen)。
一、ELISA試劑盒免疫原性的化學基礎
許多天然物質(zhì)可誘導免疫應答,其中大分子蛋白質(zhì)和多糖具有強免疫原性,小分子多肽及核酸也具有免疫原性。
(一)化學組成
大分子蛋白質(zhì),分子量大于10000者,可含有大量不同的抗原決定簇,是zui強的免疫原。如異種血清蛋白、酶蛋白及細菌毒等,是強免疫原蛋白質(zhì)的例子。
多糖是重要的天然抗原,純化多糖或糖蛋白、脂蛋白以及糖脂蛋白等復合物中的糖分子部分都具有免疫原性。在自然界,許多微生物有富含多糖的莢膜或胞壁,細菌內(nèi)毒素是脂多糖,以及一些血型抗原(A、B、C、H)也是多糖。
核酸分子多無免疫原性,但如與蛋白質(zhì)結合形成為核蛋白則有免疫原性。在自身免疫病中,可見對天然核蛋白誘導的免疫應答產(chǎn)生的抗DNA或RNA抗體。
此外,多肽類激素如胰島素雖為小分子量(6000)亦具有免疫原性。來自一種動物的胰島素,如長期用于另一種動物,亦能誘導免疫應答產(chǎn)生抗體。
(二)ELISA試劑盒分子量
凡具有免疫原性的物質(zhì),其分子量都較大,一般在1萬以上,小于1萬者呈弱免疫原性,低于4000者一般不具有免疫原性。許多小的免疫性原性分子可激發(fā)細胞免疫,而不產(chǎn)生抗體。亦有大分子量物質(zhì),如明膠分子量可達10萬,但因其為直鏈氨基酸結構,易在體內(nèi)降解為低分子物質(zhì),所以呈弱免疫原性??梢娒庖咴猿c分子量有關外,還與其化學結構相關。
(三)ELISA試劑盒化學結構
在蛋白質(zhì)分子中,凡含有大量芳香族氨基酸,尤其是含有酷氨酸的蛋白質(zhì),其免疫原性強;而以非芳香族氨基酸為主的蛋白質(zhì),其免疫原性較弱。蛋白質(zhì)和多糖抗原,凡結構復雜者免疫原性強,反之則較弱。其復雜性是由氨基酸和單糖的類型及數(shù)量等決定的。如聚合體蛋白質(zhì)分子較單體可溶性蛋白質(zhì)分子的免疫原性強。
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