目前夾心ELISA是檢測(cè)病毒抗原的常用方法,國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者均已發(fā)展或報(bào)道了夾心ELISA方法的研究應(yīng)用。Kosmidou等(1995)ELISA試劑盒由于纖維素乙醇和采用革新技術(shù)使用單克隆抗體技術(shù)建立了一種豬瘟病毒抗原的ELISA檢測(cè)方法。湯賽冬等建立了檢測(cè)豬瘟病毒抗原的夾心ELISA方法,該方法是先以zui適量純化豬瘟病毒抗體包被酶標(biāo)板,加入待測(cè)抗原,再加入酶標(biāo)抗體,zui后加入底物及終止液。
豬瘟RT-PCR ELISA診斷方法 反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)ELISA試劑盒已廣泛應(yīng)用于痘病毒和豬瘟病毒的診斷。在國(guó)外,有些學(xué)者結(jié)合RT-PCR技術(shù),又建立了用特異性熒光探針和生物素標(biāo)記的捕獲探針檢測(cè)CSFV的新方法。在我國(guó),孫世琪等建立了豬瘟RT-PCRELISA診斷方法。從CSFV 5,-UTR設(shè)計(jì)特異性引物和捕獲探針,用標(biāo)記RT-PCR產(chǎn)物,再以RT-PCREIASA方法,用生物素標(biāo)記的探針在鏈親和素包被的微量板孔中雜交捕獲RT-PCR產(chǎn)物,ELISA試劑盒并進(jìn)行免疫顯色;通過(guò)對(duì)CSFV標(biāo)準(zhǔn)菌株和分離菌株進(jìn)行檢測(cè),建立一種特異性強(qiáng)、敏感性高、快速、簡(jiǎn)便且實(shí)用的非放射性檢測(cè)CSFV的方法,為CSFV的分子流行病學(xué)調(diào)查和早期診斷提供了一條新的途徑。
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