人ELISA試劑盒重復(fù)性差緣由及解決方法:
1、樣品數(shù)量不一,加樣時(shí)間長(zhǎng)短不一。解決方法:重復(fù)某一樣品時(shí),加樣時(shí)間盡可能與*次接近。2、樣品加入后未混勻。解決方法:加樣后在混勻器上充分混勻。
3、酶標(biāo)儀濾光片不對(duì)或輸入波長(zhǎng)不對(duì)。解決方法:TMB顯色用450/630波長(zhǎng)。
4、酶標(biāo)儀測(cè)定重復(fù)性差。解決方法:校對(duì)酶標(biāo)儀。
5、洗滌不正確。解決方法:洗滌液注滿(mǎn)各孔但不要溢出。洗板時(shí)反應(yīng)板面向下,垂直用力甩凈內(nèi)容物(可多甩幾次),在干凈、無(wú)或少塵的吸水材料上拍干。洗板機(jī)洗板時(shí)不應(yīng)有堵孔,洗滌應(yīng)充分。
6、溫育條件不一致(一次用水育,一次用恒溫箱)。解決方法:恒溫箱溫育較水浴顯色深, OD值高出0.1-0.15,均采用恒溫箱.如用水浴水溫應(yīng)控制在37℃。
人ELISA試劑盒其他常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法:
1、試劑盒超過(guò)期, 超過(guò)有效期的產(chǎn)品可能會(huì)產(chǎn)生很弱的信號(hào); 試劑盒沒(méi)有按規(guī)定進(jìn)行保存,受高溫影響;
解決方法:實(shí)驗(yàn)前檢查試劑的組分及批號(hào),確認(rèn)試劑未過(guò)期。 人ELISA試劑盒不要將試劑盒長(zhǎng)時(shí)間置于常溫下,按使用規(guī)定儲(chǔ)藏。
2、試劑、樣品用前未平衡至室溫
解決方法:從低溫冰箱中取出的試劑及樣品應(yīng)置室溫平衡 20分鐘左右。
3、加入試劑的體積和時(shí)間有誤, 移液器計(jì)量不準(zhǔn),吸嘴內(nèi)水分太多或不清潔;
解決方法:確定所使用的試劑體積正確,加入時(shí)間適當(dāng)。 校正移液器,移液器與吸嘴配合要緊密吻合。移液不宜太快,排放應(yīng)*。
4、洗板及加樣過(guò)程中,酶標(biāo)受污染失活而失去催化顯色劑顯色的能力
解決方法:確認(rèn)盛酶標(biāo)的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等,確認(rèn)配制洗液的容器已洗干凈,確認(rèn)配制洗液的純化水達(dá)到要求且未受污染。
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