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原代細胞的培育質量至關重要
更新時間:2021-01-25   點擊次數(shù):1438次

原代細胞是非常靈敏的細胞,需求傳統(tǒng)培育基之外的額定養(yǎng)分物質。為了優(yōu)化存活和成長,需求針對每種細胞類型選擇特定的培育基。例如,內皮細胞對養(yǎng)分的需求與上皮細胞或神經元有很大區(qū)別,因而需求特制的內皮細胞培育基。而傳統(tǒng)的細胞培育基依靠血清供給成長因子、激素、脂質和其他的未知組分,以支持細胞的成長。但對于原代細胞,高血清水平可導致細胞分化,或促進污染細胞如成纖維細胞的成長。

原代細胞的培育是指直接從機體取下細胞、安排和器官后立即進行培育。因而,較為嚴格地說是指成功傳代之前的培育,此刻的細胞保持原有細胞的根本性質,如果是正常細胞,依然保存二倍體數(shù)。但實際上,一般把一代至第十代以內的培育細胞統(tǒng)稱為原代細胞培育,是細胞培育中很重要的,其質量決定著傳代細胞的質量,因而它的培育的質量至關重要。

 試驗步驟:
 1.試劑耗材預備;
 2.取新鮮動物安排;
 3.酶消化;
 4.過濾網挑選、別離細胞;
 5.加培育液,37℃、5%CO2培育;
 6.傳代;
 7.凍存;
 8.復蘇。
 
應用:
1.為研究生物體細胞的成長、代謝、繁殖供給有力的手段;
2.為傳代培育創(chuàng)造條件;
3.服務于僅供研究使用,

此外,增加血清也遭到成本上升及不同批次間差異性的困擾。配制具有很少或沒有血清的特殊培育基則可以防止這些問題,并且愈加有利于促進特定類型細胞的成長。此外,其他一些實踐,例如在更多的生理學相關底物上接種原代細胞而不是使用合成聚合物,可以明顯的促進細胞貼壁、增殖及保持純度。
 

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