ELISA試劑盒回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標(biāo)液1PPM,就是1毫克/升,而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系,說明方法的準(zhǔn)確度。
比如水中總無機(jī)氯含量測(cè)定,樣品水中含有無機(jī)氯20mg/L,取100mL被測(cè)水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品,測(cè)定時(shí)忽略體積變化,如果測(cè)定出樣品中無機(jī)氯為29.8mg/L,則認(rèn)為回收率為99%。
下面談?wù)凟LISA試劑盒的運(yùn)用過程:
1.ELISA試劑盒用于檢測(cè)的樣品應(yīng)保持新鮮.
2.用戶在初度運(yùn)用試劑盒時(shí),應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底.
3.每次試驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4.丈量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零.
4.要確保微量加樣器的確性,能夠運(yùn)用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確定(因?yàn)檎麴s水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20%左右時(shí),lmL的水能夠看作是lg 200 L的水能夠看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其zui高量程和zui低量程進(jìn)行確定.
5.因?yàn)榈孜镲@色劑對(duì)光及其靈敏,因此要避光保存.
6.手藝洗板時(shí)每次參加洗滌液后.應(yīng)靜置15~30s,不要將一個(gè)酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染.甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干.
7.檢測(cè)吸光度前應(yīng)將酶標(biāo)儀翻開,將其預(yù)熱30min以上.
8.底物為TMB,防止與皮膚相觸摸.終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,應(yīng)盡量防止觸摸皮膚.
9.孵育的時(shí)間應(yīng)該嚴(yán)格依照試劑盒說明書上的時(shí)間為準(zhǔn).
10.對(duì)樣本的結(jié)果有疑問時(shí)需要運(yùn)用其他檢測(cè)方法進(jìn)行驗(yàn)證.
11.沒有去離子水或雙蒸水時(shí),能夠運(yùn)用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿運(yùn)用自來水.
12.在運(yùn)用微量加樣器時(shí),汲取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使汲取標(biāo)準(zhǔn)品溶液.
13.汲取液體時(shí)速度不易太快,以免發(fā)生氣泡,汲取的量不夠準(zhǔn)確.
14.將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),防止槍頭和孔內(nèi)液體觸摸,可使槍頭上的液滴和孑L壁觸摸,液滴會(huì)自然流下去.吸入液體時(shí)的方法是吸兩檔打一檔,防止因?yàn)闃岊^的毛細(xì)作用使得部分液體不能流出而造成的誤差.
15.汲取液體時(shí)要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差.
16.試驗(yàn)前30min將試劑盒中的一切試劑從冰箱取出,使試劑盒中的一切試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,酶標(biāo)板只需取出所需量.
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